牦牛源多殺性巴氏桿菌C47-8株體外生長曲線的測定結(jié)果
牦牛出血性敗血癥是由多殺性巴氏桿菌（Pasteurella multocida，P.multocida）引起的牦牛的一種以高熱、肺炎、間或呈現(xiàn)急性胃腸炎以及內(nèi)臟器官廣泛出血為特征的急性傳染病，被列為青海省重點防控的疫病之一。
根據(jù)GenBanK中發(fā)表的多殺性巴氏桿菌（Pasteurella multocida，P.multocida）HN06株（登錄號為NC017027）的ompH核苷酸序列設(shè)計合成一對特異性引物，將PCR擴增獲得的牦牛源P.multocida C47-8的ompH基因片段連接到pMR10載體上，構(gòu)建了C47-8株ΔompH缺失株互補質(zhì)粒pMR10-ΔompH，并將該質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化至C47-8ΔompH缺失株中，成功獲得其互補菌株。
在此基礎(chǔ)上，對C47-8親本株、ΔompH缺失株以及互補株的生物學(xué)特性進行研究。形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果表明，3株菌的生長形態(tài)無差異；生化試驗結(jié)果表明，除了缺失株發(fā)酵蕈糖、硝酸鹽試驗呈現(xiàn)陽性外，3株菌的其余生化特性未發(fā)生改變；體外生長曲線表明親本株C47-8的生長速度比缺失株和互補株的生長速度慢，說明ompH基因?qū)47-8的生長有顯著影響。本試驗為深入研究P.multocida的致病機制以及研制安全有效的基因缺失減毒活疫苗奠定了基礎(chǔ)。
體外生長曲線的測定按文獻的方法測定3個菌株的OD600值，繪制細菌體外生長曲線，每個菌株做3個重復(fù)，用SPSS19.0軟件進行分析，并根據(jù)生長曲線測定出細菌的代時。
體外生長曲線的測定將P.multocida菌液每隔1 h測定3次OD600值，將得到的數(shù)據(jù)用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，并繪制體外生長曲線，結(jié)果見下圖。
C47-8親本株、缺失株和互補株體外生長曲線的測定結(jié)果
從圖可知，親本株生長速度較慢，而缺失株和互補株則生長速度較快，由此可以確定ompH基因明顯影響了C47-8的生長。
根據(jù)生長曲線測定出細菌的代時（G）C47-8親本株代時為1.248 h，缺失株為0.727 h，互補株為0.765 h。表明C47-8親本株代時最長，互補株居中，缺失株最快，說明ompH基因的缺失影響了P.multocida的生長。
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