不同溫度下殺鮭氣單胞菌的生長曲線
選擇從養(yǎng)殖生產(chǎn)系統(tǒng)分離出的殺鮭氣單胞菌菌株,進行了不同溫度及pH條件下的生長實驗研究,繪制了不同條件下殺鮭氣單胞菌的生長曲線,闡明了溫度及pH對其生長的影響,為在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中通過調(diào)控水體溫度及pH等環(huán)境因子,抑制殺鮭氣單胞菌生長,降低養(yǎng)殖魚類發(fā)病率提供了理論依據(jù)。
不同溫度下殺鮭氣單胞菌生長實驗
取1.3.1中所述種子液,按5%接種量接種于300 mL無菌LB液體培養(yǎng)基中,充分搖勻后分裝成3份,于28℃下靜置培養(yǎng),每隔2 h取樣,以無菌LB液體培養(yǎng)基作對照,用紫外分光光度計檢測菌液A600值,同時另取菌液進行梯度稀釋,于2216E瓊脂平板涂布計數(shù),統(tǒng)計數(shù)據(jù),繪制其在該溫度下的生長曲線。其他溫度(15、10、5℃)梯度條件下實驗方法類同。
不同溫度下殺鮭氣單胞菌的生長曲線
本實驗采用了A值法與平板計數(shù)法相結(jié)合的方式,對殺鮭氣單胞菌生長曲線進行測定。結(jié)果顯示,在細菌對數(shù)生長期,兩種方法測得的生長曲線變化趨勢基本一致,但在細菌對數(shù)生長期之后,菌液A值會繼續(xù)增加,而平板計數(shù)法顯示細菌生長已進入穩(wěn)定期甚至已經(jīng)開始衰亡(圖1)。對兩種方法進行比較發(fā)現(xiàn),在細菌生長對數(shù)期之后,平板計數(shù)法更能真實反映細菌生長狀態(tài)(詳見3.2)。實驗發(fā)現(xiàn),不同溫度下殺鮭氣單胞菌生長曲線差異較大(圖2)。隨著培養(yǎng)溫度的降低,殺鮭氣單胞菌生長速率下降。當(dāng)培養(yǎng)溫度為28℃時,殺鮭氣單胞菌在2h后就進入了對數(shù)生長期,并在8 h左右達到數(shù)量高峰期,為6.6×108CFU/mL。20 h之后,CFU對數(shù)值顯示其數(shù)量開始下降(圖1a)。培養(yǎng)溫度為15℃時,該菌在6 h之后進入快速增長期,從CFU對數(shù)值可以看出,在48 h左右細菌生長進入穩(wěn)定期(圖1b)。當(dāng)溫度降低到10℃時,其生長速率進一步降低(圖1c),14 h左右生長速率加快,54 h趨于穩(wěn)定。而當(dāng)溫度降低到5℃時,在36 h之內(nèi),殺鮭氣單胞菌數(shù)量無顯著變化。經(jīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),在實驗第24小時和第48小時,各溫度組殺鮭氣單胞菌數(shù)量均出現(xiàn)顯著差異(P<0.05);在第72小時,15℃及5℃條件下殺鮭氣單胞菌數(shù)量差異顯著(P<0.05),說明隨溫度降低,殺鮭氣單胞菌生長速率顯著降低(圖3)。
圖1不同溫度下殺鮭氣單胞菌生長曲線
圖2不同溫度下殺鮭氣單胞菌生長曲線的比較
圖3殺鮭氣單胞菌在不同溫度下培養(yǎng)24、48、72h的細菌對數(shù)值
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