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桑酮G對(duì)單增李斯特菌生長(zhǎng)曲線的影響

單核細(xì)胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)簡(jiǎn)稱單增李斯特菌,為兼性厭氧革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽孢桿菌李斯特菌屬,是一種普遍存在人畜共患的四大食源性致病菌之一。它能夠在低溫、低酸和高鹽在內(nèi)的大范圍不利環(huán)境條件下增殖,并且能導(dǎo)致嚴(yán)重的人類疾病,如敗血癥、腦膜炎、以及懷孕期間的嚴(yán)重并發(fā)癥(流產(chǎn)和死產(chǎn)),其死亡率可達(dá)20%-30%。雖然單增李斯特菌耐藥性在全球范圍內(nèi)處于較低水平,隨著抗生素在人類和動(dòng)物中的長(zhǎng)期使用和濫用,現(xiàn)在越來(lái)越多的國(guó)家報(bào)告了單增李斯特耐藥菌株。


冰箱冷藏室是人們經(jīng)常使用的食物保存容器,也是非常容易滋生單增李斯特菌的地方,由于單增李斯特菌的危害,因而需要定期清除其中的李斯特菌,而普通抗生素的使用不僅容易產(chǎn)生耐藥性,效果不盡人意,還會(huì)對(duì)保存冰箱里面的食物造成污染。


桑酮G(Kuwanon G)是從桑樹(shù)的桑白皮中提取出來(lái)的一種黃酮類化合物,桑白皮是桑科桑屬植物桑(Morus alba L.)的根皮,又名白桑皮、桑根白皮。桑是藥食兼用的功能植物,在東西方都作藥用。在中國(guó),桑入藥可上溯到《神農(nóng)本草經(jīng)》,以后歷代本草經(jīng)均有記載。雖然桑酮G對(duì)金黃色葡萄球菌、糞鏈球菌、枯草芽孢桿菌和某些霉菌具有很強(qiáng)的抗菌活性,還具有抗炎、降壓、抑制酶活性和降低血糖等。但有關(guān)桑酮G對(duì)單增李斯特菌的抗菌效果及抗菌機(jī)制的國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)均未報(bào)道,現(xiàn)有技術(shù)也無(wú)法預(yù)見(jiàn)桑酮G對(duì)單增李斯特菌的殺滅和抑制效果,因而我們研究了桑酮G對(duì)單增李斯特菌的抗菌效果及抗菌機(jī)制。

圖1是桑酮G對(duì)單增李斯特菌生長(zhǎng)曲線的影響圖。


桑酮G對(duì)單增李斯特菌生長(zhǎng)曲線的影響:實(shí)驗(yàn)方法同MIC和MBC測(cè)定方法一樣,藥物濃度以1/2 MIC、MIC、2 MIC和不加藥組來(lái)研究桑酮G對(duì)單核李斯特菌生長(zhǎng)曲線的影響。將以上培養(yǎng)物置于37℃,180r/min的搖床中培養(yǎng),分別在2、4、6、8、10、12、16、24、36 h時(shí)取樣,于紫外分光光度計(jì)測(cè)定其OD600 nm的吸光度值。以時(shí)間為橫坐標(biāo),吸光光度值為縱坐標(biāo),繪制桑酮G對(duì)單增李斯特菌時(shí)間劑量效應(yīng)曲線。


桑酮G對(duì)單增李斯特菌生長(zhǎng)曲線的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1,用OD600吸光度法是研究液體培養(yǎng)基中微生物生長(zhǎng)的方法之一。單增李斯特菌經(jīng)過(guò)桑酮G作用后生長(zhǎng)曲線變化明顯,且隨著藥物濃度增加,對(duì)單增李斯特生長(zhǎng)的影響也越大。桑酮G在低濃度時(shí)就能抑制細(xì)菌生長(zhǎng),延遲細(xì)菌對(duì)數(shù)期的到來(lái)且始終小于空白對(duì)照組菌濃度;當(dāng)桑酮G濃度為MIC時(shí),發(fā)現(xiàn)桑酮G對(duì)單增李斯特菌的生長(zhǎng)活性具有明顯的抑制作用;而當(dāng)菌液中藥物濃度為2 MIC時(shí),菌液OD值未有增加趨勢(shì),表明桑酮G能完全抑制單增李斯特菌的生長(zhǎng)。


首次發(fā)現(xiàn)了桑酮G對(duì)單增李斯特菌有較強(qiáng)的殺菌性能,并測(cè)定了桑酮G對(duì)單增李斯特菌的MIC和MBC,研究了桑酮G對(duì)單增李斯特菌生長(zhǎng)曲線的作用,研究了桑酮G對(duì)單增李斯特菌細(xì)胞形態(tài)的影響,發(fā)明了一種應(yīng)用桑酮G抑制單增李斯特菌的方法及應(yīng)用,該方法不僅能簡(jiǎn)單、快速、有效的清除冰箱冷藏室中的李斯特菌,制備抑制單增李斯特菌相關(guān)的藥物和消毒制劑,而且不會(huì)產(chǎn)生耐藥性,還不會(huì)對(duì)冰箱里面的食物造成污染,填補(bǔ)了一項(xiàng)該領(lǐng)域的技術(shù)空白。


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