普城沙雷菌對黃瓜生長品質、根際土壤微生物數量的影響（一）
植物根際促生細菌（plant growth promoting rhizobacteria，簡稱PGPR）是指自由存在于植物根際范圍中的一類可促進植物生長、防治病害、增加產量的細菌的統稱。PGPR菌株可通過溶磷、解鉀、固氮、產生植物激素等作用，直接促進植物生長，提高產量；還可以通過產生嗜鐵素和抗生素等抑制病原物的生存與繁殖，進而減輕作物病害，改善植物根際土壤微生態環境，間接促進植物生長。如：從辣椒根際分離得到的具有產生IAA能力的枯草芽孢桿菌NJAU-G10能顯著促進辣椒幼苗的生長和根系發育；枯草芽孢桿菌QM3能顯著增加番茄植株葉片數，促進番茄株高及根系發育，且有效防治番茄早疫病；在大豆根際同時接種慢生大豆根瘤菌和膠質類芽孢桿菌后，土壤酶活性顯著提高。由于PGPR具有促進植物生長、防治植物病害和改善植物根際土壤微生態環境的優良特性，因此，很多學者都積極投入到PGPR的開發、應用研究中。邱勤等研究指出，將PGPR菌劑施于土壤后，能顯著促進苜蓿的生長，同時增加土壤中細菌、真菌、放線菌等微生物的數量，進而提高土壤養分。普城沙雷菌（Serratia plymuthica）A21-4是從洋蔥根際土壤中分離出的辣椒疫病生防菌，能有效定殖在辣椒根系及根際土壤，抑制辣椒疫病的發生，同時，能顯著促進辣椒生長，改善辣椒根際土壤微生態環境。
在前期普城沙雷菌對辣椒的促生作用研究的基礎上，本試驗探究了普城沙雷菌對黃瓜生長及根際土壤微生態環境的影響，以期為普城沙雷菌在黃瓜實際生產中的應用提供理論依據。
1材料與方法
1.1試驗材料
普城沙雷菌的利福平標記菌株（100μL·mL-1）由河南農業大學植物病害生物防治研究室在-80℃超低溫冰箱保存備用；黃瓜品種為寒育6號（河南豫藝種業科技發展有限公司選育）；供試培養基為TSA培養基（Tryptic Soy Broth Difco.30 g，瓊脂18 g，蒸餾水1 000 mL）、AIA培養基（Actinomycete Isolation Agar Difco.22 g，蒸餾水1 000 mL）和PDA培養基（Potato Dextrose Broth Difco.24 g，瓊脂18 g，蒸餾水1 000 mL）。
1.2試驗方法
本試驗于2017年1～6月在河南省鄭州市毛莊綠園蔬菜基地進行。1月17日在日光溫室穴盤播種育苗，2月17日移栽到大棚，施肥按照蔬菜基地常規管理進行，6月15日拉秧結束。
1.2.1 普城沙雷菌菌懸液的配制及處理
將普城沙雷菌在TSA培養基上培養48 h后，用0.1 mol·L-1MgSO4無菌溶液配制成108cfu·mL-1的普城沙雷菌菌懸液。黃瓜育苗期和田間生育期分別用普城沙雷菌菌懸液處理，在育苗期，第1片真葉展開時，用普城沙雷菌菌懸液進行灌根處理（50 mL·株-1）；移栽10 d后再用普城沙雷菌菌懸液進行灌根處理（200 mL·株-1），以清水處理為對照，每個處理設3次重復，每個重復150株（6行·重復-1，25株·行-1）。
1.2.2黃瓜生育指標和生理指標的測定
2月17日，即黃瓜播種后30 d，每個重復選9株，每個處理3次重復，測定黃瓜苗期株高、莖粗、地上部鮮質量、根鮮質量和第3片真葉的葉綠素含量；3月19日，即移栽后30 d，每個重復取5株，每個處理3次重復，測定黃瓜開花期株高、莖粗、葉片數、葉面積和開花數；在黃瓜苗期（2月17日）、開花期（3月19日）、初果期（4月7日）、盛果期（5月2日）和采收后期（6月7日）分別測定根系活力。葉綠素含量的測定采用分光光度法，根系活力的測定采用氯化三苯基四氮唑法。
1.2.3黃瓜產量和品質相關指標的測定
黃瓜采收期，每個重復選取30株（6行·重復-1，5株·行-1），每個處理3次重復，采集黃瓜果實，采用稱重法測定單株黃瓜果實質量，直至結果期完結后，計算單株產量和每667 m2產量。黃瓜初果期、盛果期和采收后期分別測定品質相關指標，VC含量采用2，6-二氯酚靛酚滴定法測定，蛋白質含量采用考馬斯亮藍G250法測定，可溶性糖含量采用蒽酮比色法測定。
1.2.4黃瓜根際土壤酶活性的測定
在黃瓜開花期、初果期、盛果期和采收后期分別測定根際土壤脲酶、磷酸酶、過氧化氫酶和蔗糖酶活性。黃瓜根際土壤樣品的采集：輕輕撥開黃瓜表層土壤，收集黃瓜根際土壤，過60目篩，每處理3次重復。脲酶活性采用苯酚鈉-次氯酸鈉比色法測定，磷酸酶活性采用磷酸苯二鈉比色法測定，過氧化氫酶活性采用高錳酸鉀滴定法測定，蔗糖酶活性采用3，5-二硝基水楊酸比色法測定。
1.2.5黃瓜根際土壤微生物數量的測定
在黃瓜開花期、初果期、盛果期和采收后期分別測定黃瓜根際土壤細菌、真菌和放線菌的數量。土壤樣品的采集方法同1.2.4，根際土壤微生物的測定采用稀釋平板涂布法。稱取1 g土樣，倒入裝有100 mL無菌水的三角瓶中，充分振蕩，然后用無菌水進行梯度稀釋，配制成一系列濃度梯度的稀釋液，將0.1 mL的稀釋液均勻涂布在含PCNB的TSA平板上，置于28℃恒溫箱中培養3 d后調查細菌數量；將0.1 mL的稀釋液均勻涂布在含乳酸的PDA平板上，置于26℃恒溫箱中培養5 d后調查真菌數量；將0.1 mL的稀釋液均勻涂布在含乳酸的AIA平板上，置于28℃恒溫箱中培養7 d后調查放線菌數量。調查細菌和真菌采用新鮮土樣，調查放線菌采用自然風干的土樣。
1.2.6黃瓜根際土壤速效氮、磷、鉀的測定
在黃瓜開花期、初果期、盛果期和采收后期分別測定黃瓜根際土壤速效氮、磷和鉀的含量。土壤樣品的采集方法同1.2.4，速效氮含量的測定采用堿解擴散法，速效磷含量的測定采用碳酸氫鈉法，速效鉀含量的測定采用乙酸銨浸提，火焰光度法。
1.3數據處理與分析
采用Excel 2003和SPSS 13.0軟件進行數據分析，采用Duncan氏新復極差法（SSR法）進行顯著性檢驗。
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